色谱基础知识

色谱技术是一种广泛应用于化学分析的分离方法，通过样品在固定相和流动相之间的分配差异，实现混合物中各组分的分离和检测。以下是色谱技术的基本概念和分类，以及其应用领域的简介。

  色谱技术的基本概念  

1、固定相

固定相是色谱系统中用于吸附或分配样品组分的材料，可以是固体或液体，通常涂覆在支持介质上。固定相的特性决定了分离的选择性。

2、流动相

流动相是带动样品通过固定相的液体或气体，样品组分在流动相和固定相之间分配，形成不同的滞留时间，从而实现分离。

3、保留时间保留时间

样品组分从进样到被检测到所需的时间，用于表征不同组分的分离行为。

4、分离机制

样品分离主要基于以下机制之一或组合：

吸附作用

分配作用

离子交换

分子排阻

  色谱的分类  

根据操作模式和分离原理，色谱技术主要分为以下几类：

1、按流动相分类

气相色谱：

以气体为流动相，适合挥发性和热稳定性样品。

液相色谱：

以液体为流动相，适合不挥发或热不稳定样品。

2、按固定相分类

柱色谱：

固定相填充在色谱柱中，是最常见的形式。

薄层色谱：

固定相涂覆在玻璃板或塑料片上，适合快速筛查。

3、按分离机制分类

分配色谱：

利用样品在流动相和固定相间的溶解性差异。

吸附色谱：

利用样品分子与固定相表面吸附能力的不同。

离子交换色谱：

利用样品离子与固定相离子交换能力的差异。

凝胶色谱：

根据分子大小差异进行分离，也称分子筛色谱。

  液相色谱（HPLC）的知识  

HPLC 是现代液相色谱的技术，使用高压泵驱动流动相，固定相通常是填充在色谱柱中的颗粒材料。

1、主要组件

泵：提供高压流动相输送。

进样器：用于准确控制样品的进样量。

色谱柱：包含固定相，用于分离样品。

检测器：检测经过色谱柱后的样品组分，常见类型有UV、荧光、质谱等。

2、分离模式

正相色谱：固定相极性高，流动相极性低，适合非极性化合物分离。

反相色谱：固定相极性低（如C18柱），流动相极性高，适合极性化合物分离。